Avaliação dos métodos de esfregaço fecal para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes de bezerros da bovinocultura de leite

Autores

DOI:

https://doi.org/10.5433/1679-0359.2022v43n2p585

Palavras-chave:

Nested-PCR, Oocistos, Protozoário, Ziehl-Neelsen.

Resumo

O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos de esfregaço fecal direto (DFS) e centrífugo sedimentação (CS) para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros leiteiros. Foram coletadas 114 amostras fecais de bezerros com até seis meses de idade, provenientes de dez propriedades leiteiras localizadas nos municípios de Palotina e Francisco Alves, Paraná. Por meio da análise microscópica, foi possível observar oocistos de Cryptosporidium spp. em 51,75% (59/114) das amostras. Pelo método da CS foi identificada positividade em 48,25% (55/114) das amostras, enquanto nas lâminas pelo método do esfregaço fecal direto (DFS), apenas 6,14% (7/114) foram positivas. Somente 4 amostras foram positivas exclusivamente no método do DFS. Para assegurar que na análise microscópica não houvesse resultados falso-negativos, as 55 amostras negativas para os dois métodos de confecção de lâminas (DFS e CS) foram selecionadas para análise molecular por meio da técnica de Nested PCR. Das 55 amostras submetidas a nPCR, 24% (13/55) apresentaram-se positivas e foram encaminhadas para o sequenciamento genético de uma porção do genoma, o qual possibilitou identificar as espécies de C. parvum, C. bovis e C. ryanae. Além da caracterização das espécies de Cryptosporidium, foi possível identificar a presença de bactérias do gênero Acinetobacter interferindo diretamente nas amostras analisadas. A análise microscópica revelou maior sensibilidade quando o método de CS foi usado para a confecção dos esfregaços fecais, entretanto, amostras negativas por meio dessa metodologia apresentaram resultados positivos na nPCR. Desta forma, para a confirmação dos casos de Cryptosporidium spp., é indicado a realização da análise molecular. Novos estudos são necessários para se comprovar a especificidade dos primers utilizados, uma vez que na nPCR o resultado obtido foi positivo, porém ao realizar o sequenciamento genético houve a identificação de Acinetobacter spp.

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Biografia do Autor

Ana Paula Molinari Candeias, Universidade Federal do Paraná

Mestranda do Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Federal do Paraná, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

Gabrieli Maria Huff, Universidade Federal do Paraná

Graduando em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

Adriana Fiorini Rosado, Universidade Federal do Paraná

Profa Dra do Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Departamento de Biociências, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

André Luis Vriesman Beninca, Universidade Federal do Paraná

Mestrando do Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Federal do Paraná, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

Laura Zanella Souza, Universidade Federal do Paraná

Mestranda do Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Federal do Paraná, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

Silvia Cristina Osaki, Universidade Federal do Paraná

Profa Dra do Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Departamento de Ciências Veterinárias, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

Nelson Luis Mello Fernandes, Universidade Federal do Paraná

Prof. Dr. do Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Departamento de Ciências Veterinárias, UFPR, Palotina, PR, Brasil.

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Publicado

2022-02-25

Como Citar

Candeias, A. P. M., Huff, G. M., Rosado, A. F., Beninca, A. L. V., Souza, L. Z., Osaki, S. C., & Fernandes, N. L. M. (2022). Avaliação dos métodos de esfregaço fecal para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes de bezerros da bovinocultura de leite. Semina: Ciências Agrárias, 43(2), 585–598. https://doi.org/10.5433/1679-0359.2022v43n2p585

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