Efeito do método de criopreservação utilizado, estágio de desenvolvimento embrionário e uso de isômeros do ácido linoleico conjugado na criotolerância de embriões bovinos produzidos in vitro

Autores

  • Luciana Simões Rafagnin Marinho UEL
  • Lain Uriel Ohlweiler Universidade do Estado de Santa Catarina
  • Marcos Henrique Barreta Universidade Federal de Santa Catarina
  • Paulo Bayard Dias Gonçalves Universidade Federal de Santa Maria
  • Joana Claudia Mezzalira Universidade do Estado de Santa Catarina
  • Alceu Mezzalira Universidade do Estado de Santa Maria

DOI:

https://doi.org/10.5433/1679-0359.2015v36n6Supl2p4297

Palavras-chave:

Congelação, Lipídeo, Expressão de mRNA, Vitrificação.

Resumo

Existem evidências de que o ácido linoleico conjugado (CLA) pode aumentar a criotolerância de embriões produzidos in vitro (PIV). O efeito de dois isômeros do CLA na criotolerância de embriões bovinos PIV, assim como o estágio de desenvolvimento e o efeito do método de criopreservação, foi avaliado através de três experimentos. No Experimento 1, oócitos (n = 3.917) foram fecundados in vitro e embriões foram cultivados com 0, 50, 100 ou 200 ?M de trans-10, cis-12 (t10, c12 CLA). No Experimento 2, oócitos fecundados (n = 2.131) foram cultivados com 100 ?M de t10, c12 ou cis-9, trans-11 (c9, t11 CLA), ou ainda com uma associação de ambos. Os embriões foram vitrificados nos estágios de blastocisto (BL) ou blastocisto expandido (BE). No Experimento 3, oócitos (n = 1.720) foram fecundados e cultivados com ou sem 100 ?M de t10, c12 CLA e os blastocistos foram vitrificados ou congelados. As taxas de desenvolvimento dos blastocistos, bem como de re-expansão e eclosão após o reaquecimento foram observadas. Adicionalmente, o número médio de células e a expressão de mRNA das enzimas acetil-CoA carboxilase (ACC1) e estearoil-CoA dessaturase (SCD1) e do complexo enzimático ácido graxo sintase (FASN) foram avaliados. No Experimento 1, a maior concentração de t10, c12 CLA que não reduziu a taxa de blastocisto foi 100 ?M. No Experimento 2, as taxas de re-expansão e eclosão obtidas entre EB obtidos por PIV após suplementação com t10, c12 CLA (73,1 e 57,7%), com c9, t11 CLA (80,0 e 68,6%), com a associação de ambos (78,3 e 52,2%) e com o grupo Controle (85,4 e 58,3%) foram similares. As taxas de re-expansão e eclosão foram mais baixas no estágio de BL do que no estágio de BE, e a associação dos isômeros apresentou taxa de eclosão (8,0%) mais baixa do que a do grupo controle (40,0%). No Experimento 3, as taxas de eclosão obtidas com os grupos BE vitrificado (controle vitrificado; 67,4%) e BE CLA vitrificado (65,8%) foram mais altas do que as obtidas com BE congelados, expostos (13.3%) ou não (28.6%) ao CLA. Também no Experimento 3, as taxas de eclosão foram mais altas com embriões em estágio de BE nos grupos vitrificados, enquanto nos grupos congelados as taxas de BL e BE foram similares, provando que a vitrificação foi mais eficiente do que o congelamento para embriões bovinos PIV. No Experimento 3, também foi observado que o CLA não influenciou o número de células dos embriões ou a expressão de mRNA das enzimas ACC1 e SCD1, mas reduziu a expressão de mRNA do complexo enzimático FASN. Em conclusão, 100 ?M CLA não afetou o desenvolvimento embrionário subsequente. Entretanto, os isômeros do CLA não melhoraram a criotolerância de embriões bovinos PIV.

Métricas

Carregando Métricas ...

Biografia do Autor

Luciana Simões Rafagnin Marinho, UEL

Discente, Universidade Estadual de Londrina, UEL, Londrina, PR, Brasil. 

Lain Uriel Ohlweiler, Universidade do Estado de Santa Catarina

Discente, Universidade do Estado de Santa Catarina, UDESC, Lages, SC, Brasil. 

Marcos Henrique Barreta, Universidade Federal de Santa Catarina

Prof., UFSC, Curitibanos, SC, Brasil. 

Paulo Bayard Dias Gonçalves, Universidade Federal de Santa Maria

Prof., UFSM, Santa Maria, RS, Brasil. 

Joana Claudia Mezzalira, Universidade do Estado de Santa Catarina

Discente, Universidade do Estado de Santa Catarina, UDESC, Lages, SC, Brasil. 

Alceu Mezzalira, Universidade do Estado de Santa Maria

Prof., UFSC, Curitibanos, SC, Brasil. 

Downloads

Publicado

2015-12-16

Como Citar

Marinho, L. S. R., Ohlweiler, L. U., Barreta, M. H., Gonçalves, P. B. D., Mezzalira, J. C., & Mezzalira, A. (2015). Efeito do método de criopreservação utilizado, estágio de desenvolvimento embrionário e uso de isômeros do ácido linoleico conjugado na criotolerância de embriões bovinos produzidos in vitro. Semina: Ciências Agrárias, 36(6Supl2), 4297–4310. https://doi.org/10.5433/1679-0359.2015v36n6Supl2p4297

Edição

Seção

Artigos

Artigos mais lidos pelo mesmo(s) autor(es)