Clonagem, expressão e diversidade na seqüência do gene iss de Escherichia coli patogênica para aves (APEC), isolada no Brasil

Ana Angelita Sampaio Baptista, Renata Katsuko Takayama Kobayashi, Emerson José Venâncio, Marilda Carlos Vidotto

Abstract


A proteína Iss (increased serum survival) é uma importante característica de resistência ao sistema complemento da Escherichia coli patogênica para aves (APEC). Os objetivos deste trabalho foram clonar e verificar a diversidade da seqüência do gene iss de APEC e caracterizar a proteína Iss recombinante. O gene iss de 309 bp foi amplificado por PCR, clonado e expresso na E. coli BL21 (DE3) utilizando o vetor pET SUMO. O gene iss da APEC9 foi classificado como iss tipo 1 pela diferenciação entre 3 tipos de iss alelos. A proteína Iss foi expressa pela indução com IPTG, purificada em coluna com resina ligada ao íon níquel e utilizada na imunização de galinhas poedeiras. Anticorpos da classe IgY anti rIss reagiram com a proteina rIss, a qual apresentou massa molecular de 22 kDa, correspondendo 11kDa da Iss e 11 kDa da proteína SUMO.


Keywords


Escherichia coli patogênica para aves (APEC); Gene iss; Clonagem; Riss; Resistência sérica



DOI: http://dx.doi.org/10.5433/1679-0359.2010v31n3p723

Semina: Ciênc. Agrár.
Londrina - PR
E-ISSN 1679-0359
DOI: 10.5433/1679-0359
E-mail: semina.agrarias@uel.br
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