EFEITO DO SILENCIAMENTO DA PKR ATRAVÉS DE RNA DE INTERFERÊNCIA NO CRESCIMENTO DO MELANOMA B16-F10.

Autores

  • Nayara Delgado André Bortoleto Universidade Federal de São João del Rei-Campus CCO
  • Viviane Aline Oliveira Silva Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-USP.
  • Fernando Luiz De Lucca Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-USP.

DOI:

https://doi.org/10.5433/2316-5200.2013v2n2espp82

Palavras-chave:

PKR, RNA de interferência, melanoma B16-F10, crescimento tumoral.

Resumo

O presente trabalho utilizou a tecnologia do RNA de interferência no modelo de melanoma murino com o objetivo de investigar o papel da proteína quinase dependente de RNA sobre o crescimento tumoral. Cerca de 7x105 células de melanoma B16-F10  foram transfectadas com shRNAs anti-PKR e Lipofectamina por 5 horas. O efeito do silenciamento foi analisado por PCR semi-quantitativo e Western blot após 24 e 48 horas de transfecção. Para os ensaios in vivo as células B16-F10 transfectadas com vetor psiSTRIKE PKR-2 shRNA foram inoculadas  pela via subcutânea em camundongos C57BL/6 e após 14 dias os camundongos foram sacrificados e o tumor removido e pesado. Nossos resultados demonstraram redução significativa da expressão do RNAm da PKR e da proteína após 48h de transfecção. A análise do peso tumoral indicou uma redução de 86% no crescimento tumoral indicando que esta quinase exerce um papel positivo na proliferação celular.

Biografia do Autor

Nayara Delgado André Bortoleto, Universidade Federal de São João del Rei-Campus CCO

Grupo de Atuação Docente em Bioquímica

Viviane Aline Oliveira Silva, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-USP.

Departamento de Bioquímica e Imunologia.

Fernando Luiz De Lucca, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-USP.

Departamento de Bioquímica e Imunologia.

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Publicado

2013-07-15